Ero sivun ”Korkean erotuskyvyn nestekromatografia” versioiden välillä

'''Korkean erotuskyvyn nestekromatografia''', josta yleisimmin käytetään lyhennettä '''HPLC''' ({{k-en|High Performance Liquid Chromatography}}), on [[Kromatografia|kromatografinen]] menetelmä, jota käytetään [[yhdiste]]iden erottamiseen, tunnistamiseen ja [[kvantitatiivinen analyysi|kvantitatiiviseen analysointiin]]. HPLC -analytiikasta on tullut yksi yleisimmistä kemiallisen analytiikan instrumentaalisista menetelmistä ja sillä on laajat käyttösovellukset lähes kaikilla [[kemia]]n aloilla.

HPLC -laitteistossa [[liuotin|liuottimeen]] liuotettu näyte pakotetaan kulkemaan [[kolonni]]n läpi, joka on pakattu tiiviisti hienojakoisella [[stationaarifaasi]]lla. Yhdisteiden erottuminen korkean erotuskyvyn nestekromatografiassa perustuu yhdisteiden vuorovaikutukseen kiinteän stationäärifaasin ja liikkuvan nestemäisen [[faasi]]n välillä. Erottuneet yhdisteet havaitaan [[detektori]]lla, jonka avulla yhdisteitä voidaan esimerkiksi tunnistaa sekä määrittää niiden pitoisuuksia näytteessä.

HPLC -laitteisto koostuu yksinkertaisimmillaan liuossäiliöstä, korkean paineen tuottavasta liuospumpusta, kolonnista ja detektorista. Modernin HPLC -laitteiston kokoonpano voi sisältää myös esimerkiksi liuosten kaasunpoistoyksikön, seospumpun, automaattisen näytteensyöttäjän, kolonniuunin ja datan käsittely-yksikön ([[tietokone]]en).

'''Kolonni''' on osa, jossa yhdisteiden erottuminen tapahtuu. Kolonni koostuu yleensä terässylinteristä, joka on tiiviisti pakattu hyvin hienojakoisella kiinteällä aineella, jota kutsutaan stationaarifaasiksi. Stationaarifaasin koostumus vaihtelee käyttösovelluksesta riippuen. Yleisin stationaarifaasin materiaali on [[silika]] tai kemiallisesti modifioitu silika. Kemiallisesti modifioidussa silikassa silikaan on kinnitettykiinnitetty jokin kemiallinen ryhmä, kuten syano-, amino-, dioli, nitro-, fenyyli-, C18-, C8-, tai C2-ryhmä. Myös muita materiaaleja voidaan käyttää, kuten [[alumiinioksidi]]a.

'''Pumppu''' HPLC -laitteistossa pystyy tuottamaan tyypillisesti yli 300 [[baari|bar]] korkean paineen, jota tarvitaan liuottimen pumppaamiseen tiivisti pakatun stationaarifaasin läpi. Yleensä pumpuilla voidaan myös tuottaa hyvin tarkasti kahden tai useamman liuottimen seoksia siten, että liuosten tilavuussuhteita voidaan analysoinnin aikana portaattomasti muuttaa.