Larry Daley ([[Ben Stiller]]) on ollut monessa työssä, mutta hän päättää hankkia vakituisen työpaikan, jotta voisi näyttää parempaa esimerkkiä pojalleen. Hän uskoo saaneensa unelmatyön luonnontieteellisestä museosta yövartijanayövartijan virasta. TyöKun eiaurinko tosinlaskee oleyhtäkkiä niinLarry ihanteellinen,huomaa jonatyrannosauruksen hänluurangon sitäkadonneen! pitääKun nhän lähtee etsimään luurankoa Larry löytää sen juomasta vettä. 12 metrinen hirviö lähtee Larryn perään. Larry lukee ohjeista mitä pitäisi tehdä:ohjeissa lukee heitä luu. Samalla [[tyrannosaurus]] irroittaa yhden kylkiluistaan ja vie sen Larrylle! Larry heittää sen ja t-rex lähtee luun perään. T-rex tuo luun takaisin mutta sen olemus on muuttunut täysin:se on kuin [[koira]]n[[pentu]], silläjoka haluaisi vain leikkiä. Larry heittää luun taas ja t-rex yöllälähtee museotaas herääsen henkiinperään. Larrya museon järjestyksen ylläpidossa auttaa [[Theodore Roosevelt|presidentti Rooseveltin]] vahanukke.
Entiset yövartijat yrittävät varastaa taulun, joka herättää kaiken museossa auringon laskettua.
